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其他方法試劑盒
- 磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑盒-競爭法檢測
- 上海恒遠(yuǎn)生物從事酶聯(lián)免疫學(xué)10年有余，技術(shù)成熟，產(chǎn)品穩(wěn)定。恒遠(yuǎn)品牌自主研發(fā)ELISA試劑盒，現(xiàn)已涵蓋20多個種屬，數(shù)千種產(chǎn)品，涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領(lǐng)域。其ELISA試劑盒不僅檢測指標(biāo)豐富，還可以根據(jù)實驗需求定制檢測范圍，并且提供實驗外包與免費(fèi)代測服務(wù)。歡迎您來電咨詢。
磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑盒
貨號：HB158-SH
規(guī)格：96T
價格：￥2500
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的：
本試劑盒用于測定樣本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）水平。用純化的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P），和HRP標(biāo)記的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗原，使它們競爭結(jié)合，，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。
試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
8 |
標(biāo)準(zhǔn)品S1（800 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
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2 |
酶標(biāo)試劑 |
6ml×1瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)品S2（400 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
3 |
酶標(biāo)包被板 |
12孔×8條 |
標(biāo)準(zhǔn)品S3（200 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
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4 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)品S4（100ng/L ） |
0.5ml×1瓶 |
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5 |
顯色劑B液 |
6ml×1瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)品S5（50ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
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|
6 |
終止液 |
6ml×1/瓶 |
9 |
說明書 |
1份 |
|
7 |
樣品稀釋液 |
6ml×1/瓶 |
10 |
封板膜 |
2張 |
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本處理：（1）水樣 采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次，再經(jīng)玻璃纖維過濾后，備查
（2）組織 樣品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，備查
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
7. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
8. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
詳細(xì)說明書請咨詢業(yè)務(wù)員！
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